關(guān)于高效液相色譜法的操作步驟視頻，高效液相這個(gè)很多人還不知道，今天菲菲來為大家解答以上的問題，現(xiàn)在讓我們一起來看看吧！

1、高效液相的原理：液相色譜是一類分離與分析技術(shù)，其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。

2、在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中．為了區(qū)分各種方法，根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名，如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。

3、液相色譜是一類分離與分析技術(shù)，其特點(diǎn)是以液體作為流動(dòng)相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。

4、在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中．為了區(qū)分各種方法，根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名，如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。

5、經(jīng)典液相色譜的流動(dòng)相是依靠重力緩慢地流過色譜柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。

6、分離后的樣品是被分級(jí)收集后再進(jìn)行分析的，使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢，而且操作也比較復(fù)雜。

7、直到20世紀(jì)60年代．發(fā)展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高壓輸液泵和自動(dòng)記錄的檢測(cè)器，克服了經(jīng)典液相色譜的缺點(diǎn)，發(fā)展成高效液相色譜，也稱為高壓液相色譜。

8、擴(kuò)展資料：高效液相統(tǒng)稱為高柱效、高壓力、高效率的液相色譜。

9、根據(jù)液相色譜原理，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分離。

10、其原理可采用分配色譜，也可采用吸附色譜等等，其大體結(jié)構(gòu)為：泵（用來輸送流動(dòng)相，即溶劑/洗脫液,A相一般為水溶性溶劑，B相一般為有機(jī)溶劑，如乙腈、甲醇等），調(diào)節(jié)閥（分為單向或雙向調(diào)節(jié)閥），色譜柱（用來分離物質(zhì)，物質(zhì)一般加在柱頭），檢測(cè)器（檢測(cè)物質(zhì)分離情況，一般可分為紫外，蒸發(fā)光散射等等）。

11、根據(jù)泵的結(jié)構(gòu)可分為一元泵、二元泵、四元泵等，根據(jù)泵的壓力可分為低壓單元、高壓單元等。

12、高效液相色譜法有“四高一廣”的特點(diǎn)：①高壓：流動(dòng)相為液體，流經(jīng)色譜柱時(shí)，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對(duì)載液加高壓。

13、②高速：分析速度快、載液流速快，較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個(gè)樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時(shí)。

14、③高效：分離效能高。

15、可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

16、④高靈敏度：紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)。

17、⑤應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢(shì)。

18、⑥柱子可反復(fù)使用：用一根柱子可分離不同化合物⑦樣品量少、容易回收：樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。

19、此外高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長，相互補(bǔ)充。

20、高效液相色譜的缺點(diǎn)是有“柱外效應(yīng)”。

21、在從進(jìn)樣到檢測(cè)器之間，除了柱子以外的任何死空間（進(jìn)樣器、柱接頭、連接管和檢測(cè)池等）中，如果流動(dòng)相的流型有變化，被分離物質(zhì)的任何擴(kuò)散和滯留都會(huì)顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬，柱效率降低。

22、高效液相色譜檢測(cè)器的靈敏度不及氣相色譜。

23、參考資料來源：百度百科-液相色譜百度百科-高效液相色譜。

本文到此分享完畢，希望對(duì)大家有所幫助。

標(biāo)簽： 高效液相