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    引物設(shè)計(jì)的原則和注意事項(xiàng)(引物設(shè)計(jì)的原則)

    2022-08-30 22:46:11 來(lái)源: 用戶: 

    關(guān)于引物設(shè)計(jì)的原則和注意事項(xiàng),引物設(shè)計(jì)的原則這個(gè)很多人還不知道,今天菲菲來(lái)為大家解答以上的問題,現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧!

    1、引物設(shè)計(jì)的原則和試驗(yàn)?zāi)康氖窍嚓P(guān)的。

    2、 如果是為了檢測(cè)某一個(gè)片段有沒有,那么只要考慮特異性和片段好不好擴(kuò)就行了。

    3、一般片段大小控制在500bp左右,上下游引物在57-57度退火溫度,引物互補(bǔ)情況不嚴(yán)重,不如不超過(guò)5個(gè),單引物沒有發(fā)卡結(jié)構(gòu),那么這樣的引物就比較好用了。

    4、 但是如果是為了克隆基因,那么片段大小就固定了,我們只能在特定的一小段上設(shè)計(jì)上下游引物,只能盡量的在引物長(zhǎng)度(盡量控制在21-25bp)、GC含量(盡量控制在40%-60%)等方面綜合考慮。

    5、 引物設(shè)計(jì)的好,PCR的難度就降低了;引物設(shè)計(jì)的不好用,后續(xù)試驗(yàn)會(huì)有很大的難度。

    6、 如果有具體問題,可以逐一的提出具體的問,問的太籠統(tǒng)了不好回答。

    7、 祝你好運(yùn)!不要太依賴軟件。

    本文到此分享完畢,希望對(duì)大家有所幫助。

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