污水中糞大腸菌群檢測方法(大腸菌群檢測方法)
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1、進入無菌室步驟1. 進入無菌室前應(yīng)打開紫光燈進行滅菌,時間為0。
2、5—1小時。
3、2. 關(guān)燈后0?5小時后放可進入。
4、3. 進入更衣間更換衣服,佩帶口罩、帽子、鞋套實驗步驟1, 進入無菌室后,先把酒精燈點燃,然后在用酒精棉進行手部消毒。
5、(酒精棉是用75%的酒精加入脫脂棉中制成)2, 準備雙料管3根,單料管6根,培養(yǎng)皿7個。
6、3, 直接從原液中吸取10ml放入雙料管,(3根每根各10ml)4, 再吸取原液1ml放入單料管中(3根每根各1ml)5, 再吸取原液1ml放入培養(yǎng)皿中(2個培養(yǎng)皿各1ml)6, 再吸取原液1ml放入鹽水管中制成-1梯度的樣液7, 更換一根吸管,從-1梯度的樣液吸取1ml樣液放入單料管中(3根每根各1ml)8, 再吸?。?梯度樣液1ml放入培養(yǎng)皿中(2個培養(yǎng)皿各1ml)9, 再把每個培養(yǎng)皿中到入營養(yǎng)瓊脂平鋪底部搖允(注另作3個培養(yǎng)皿:空氣空白,把培養(yǎng)皿打開十分鐘倒入營養(yǎng)瓊脂平鋪底部搖勻。
7、瓊脂空白,把培養(yǎng)皿中倒入營養(yǎng)瓊脂平鋪底部搖勻。
8、鹽水空白,吸1ml生理鹽水放入培養(yǎng)皿中,倒入營養(yǎng)瓊脂平鋪底部搖勻。
9、)10, 把全部作好的放入培養(yǎng)箱中,溫度36C+-1×C,大腸24H+-2H,菌落48H+-2H,(待培養(yǎng)皿中的瓊脂凝固后反轉(zhuǎn)過來放入培養(yǎng)箱中)11, 梯度:-1梯度為1ml原液加入9ml生理鹽水配成 -2梯度為1ml-1梯度樣液加入9ml生理鹽水配成 -3梯度-4梯度配制方法和--2梯度的配制方法一樣12, 如果大腸初發(fā)酵產(chǎn)生氣泡,用接種筆沾一個產(chǎn)氣的液在伊紅美蘭平板上畫之字形然后放入培養(yǎng)箱中36C,24H+-2H 。
10、(接種筆在每次使用前必須在酒精燈上消毒。
11、所畫之形不能劃破伊紅美蘭瓊脂表面)13, 取出后在用接種筆在伊紅美蘭平板之字形上挑菌,放入乳糖復(fù)發(fā)酵管中 ,然后再培養(yǎng)36C+-1C,24H++-2H。
12、14, 再在伊紅美蘭平板之字形上挑菌,放到載玻片上作鏡檢。
13、(方法見標準)15, 只有鏡檢成紫紅色和乳糖復(fù)發(fā)酵管產(chǎn)氣同時成立的情況下,才能斷定這根管是不合格。
14、16, 清洗消毒這根試管前必須進行消毒霉菌,121C,0。
15、5小時同時不能放氣。
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